{"id":144,"date":"2014-02-08T09:45:47","date_gmt":"2014-02-08T09:45:47","guid":{"rendered":"http:\/\/perso.ens-lyon.fr\/camille.paoletti\/?page_id=144"},"modified":"2014-04-13T00:05:41","modified_gmt":"2014-04-12T22:05:41","slug":"internships","status":"publish","type":"page","link":"http:\/\/camillepaoletti.org\/fr\/internships\/","title":{"rendered":"Stages"},"content":{"rendered":"

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D\u00e9veloppement d’outils de microfluidique pour \u00e9tudier les m\u00e9canismes de vieillissement chez la levure<\/strong><\/p>\n

Sous la direction de Gilles Charvin, Biophysique de la cellule unique –\u00a0IGBMC<\/a>, Strasbourg, France \/\/ Avril-Ao\u00fbt 2011<\/p>\n

Les cellules de levure du boulanger se divisent asym\u00e9triquement. On peut donc identifier une m\u00e8re de sa fille nouvellement form\u00e9e, cette derni\u00e8re \u00e9tant plus petite. Chaque m\u00e8re produit un nombre limit\u00e9 de filles (env. 25) avant d’entrer dans un processus de s\u00e9nescence puis de finir par mourir. De fa\u00e7on remarquable, m\u00eame les filles de m\u00e8res ag\u00e9es naissent avec un potentiel r\u00e9plicatif (RLS) intact (RLS; nombre total de divisions cellulaires). Ainsi, il existe un m\u00e9canisme de r\u00e9juv\u00e9nation qui permet d’\u00e9viter la s\u00e9nescence clonale. Bien que l’effet de nombreuses mutations sur le RLS soit connu, les causes pr\u00e9cises des m\u00e9canismes de s\u00e9nescence et de r\u00e9juv\u00e9nation et donc leur h\u00e9ritabilit\u00e9 sont tr\u00e8s mal comprises. Au laboratoire, nous avons d\u00e9velopp\u00e9 un syst\u00e8me de microfluidique pour mesurer la dynamique de division cellulaire et suivre, pour la premi\u00e8re fois au monde, \u00a0une unique cellule de sa naissance jusqu’\u00e0 sa mort ! \u00a0Gr\u00e2ce \u00e0 ce syst\u00e8me, nous pouvons ainsi esp\u00e9rer mieux comprendre les m\u00e9canismes de s\u00e9nescence et de r\u00e9juv\u00e9nation.<\/p>\n

Si ce th\u00e8me vous int\u00e9resse, n’h\u00e9sitez pas \u00e0 vous rendre dans la rubrique \u00ab\u00a0Publications\u00a0\u00bb<\/p>\n

Image (droite): Syst\u00e8me microm\u00e9trique de microfluidique nomm\u00e9 CLiC permettant de pi\u00e9ger une cellule m\u00e8re de sa naissance jusqu’\u00e0 sa mort. En bas, les cellules prolif\u00e8rent et colonisent le syst\u00e8me CLiC. Barre d’\u00e9chelle : 5\u00b5m.<\/td>\n

\u00a0\"Clic\"<\/a><\/td>\nAblations laser dans l’aile de pupe de\u00a0Drosophile<\/em><\/strong><\/p>\n


\n<\/strong>Sous la direction de\u00a0Yohanns Bellaiche<\/a>, Biologie du d\u00e9veloppement, UMR934\u00a0Institut Curie<\/a>, Paris, France \/\/ Janvier-Mars 2011<\/p>\n

Planar cell rearrangements control epithelial tissue morphogenesis and cellular pattern formation. They lead to the formation of new junctions whose length and stability determine the cellular pattern of tissues. Here, we show that during\u00a0Drosophila<\/em>\u00a0wing development the loss of the tumor suppressor PTEN disrupts cell rearrangements by preventing the lengthening of newly formed junctions that become unstable and keep on rearranging. We demonstrate that the failure to lengthen and to stabilize is caused by the lack of a decrease of Myosin II and Rho-kinase concentration at the newly formed junctions. This defect results in a heterogeneous cortical contractility at cell junctions that disrupts regular hexagonal pattern formation. By identifying PTEN as a specific regulator of junction lengthening and stability, our results uncover how a homogenous distribution of cortical contractility along the cell cortex is restored during cell rearrangement to control the formation of epithelial cellular pattern.Picture (right): Drosophila<\/em> wing ephithelium. The tumor suppressor PTEN was disrupted in cells inside the white contour. Such mutant cells rearrange into chocolate bars (cobblestone –\u00a0orange contours) or rosettes (yellow contours). During this internship, I probed the tension of cellular junctions in wild type cells (outside the white contour) and PTEN mutant cells and established that there is no difference of tension in PTEN mutant cells and wild type cells.<\/td>\n

\"PTEN\"<\/a><\/td>\nBiomim\u00e9tisme des diatom\u00e9s<\/strong><\/p>\n

Sous la direction de Christian Grillet,\u00a0CUDOS<\/a>, Universit\u00e9 de Sydney, Australie \/\/ Mai-Juillet 2010<\/p>\n

Les diatom\u00e9s sont des algues dont les coquilles de verre peuvent pr\u00e9senter des structures p\u00e9riodiques. Ainsi, elles pourraient th\u00e9oriquement se comporter comme des cristaux photoniques. Le but de ce stage \u00e9tait de d\u00e9velopper des outils afin de caract\u00e9riser les nano-structures des diatom\u00e9s, de mesurer leurs propri\u00e9t\u00e9s photoniques, et de comparer ces r\u00e9sultats exp\u00e9rimentaux avec les pr\u00e9dictions th\u00e9oriques et simul\u00e9es. Pour cette \u00e9tude, nous avons choisi l’esp\u00e8ce\u00a0Coscinodiscus walesii<\/em>. J’ai pu caract\u00e9riser la structure de ce diatom\u00e9 en analysant des images de microscopie optique et \u00e9lectronique. J’ai \u00e9galement simul\u00e9 leur comportement \u00e0 l’aide du logiciel RSoft et obtenu une strucure de bandes caract\u00e9ristique d’un r\u00e9seau p\u00e9riodique. Pour finir, j’ai mis en place deux montages exp\u00e9rimentaux permettant de mesurer les propri\u00e9t\u00e9s photoniques des diatom\u00e9s. Le premier bas\u00e9 sur fibre optique en fuseau pour mesurer le couplage evanescent. En accord avec les simulations, aucun couplage n’a \u00e9t\u00e9 observ\u00e9. Le second bas\u00e9 sur un laser \u00e0 incidence normale dans le but d’observer dans quelle mesure les diatom\u00e9s se comportaient comme des micro-lentilles.<\/p>\n

Image (droite): Diatom\u00e9\u00a0Coscinodiscus walesii<\/em>\u00a0observ\u00e9 au microscope. Gr\u00e2ce \u00e0 son r\u00e9seau hexagonal de trous de silice, cette algue marine se comporte comme une micro-lentille !<\/td>\n

\u00a0\"diatom\"<\/a><\/td>\nMesure du rapport nucl\u00e9o-cytoplasmique par microscopie de d\u00e9convolution<\/strong><\/p>\n

Sous la direction de Gilles Charvin, Biophysique de la cellule unique –\u00a0ENS Lyon<\/a>, France \/\/ Juin-Juillet 2009<\/p>\n

Les m\u00e9canismes sous-jacents au contr\u00f4le de la taille de la cellule de levure et de ses organelles sont tr\u00e8s \u00e9tudi\u00e9s dans le domaine de la biologie cellulaire, mais restent en grande partie inconnus. Cependant, le contr\u00f4le de l’\u00e9volution de ces tailles est essentiel pour le bon focntionnement du cycle cellulaire. Au cours de ce stage de deux mois, j’ai \u00e9valu\u00e9 le rapport nucl\u00e9o-cytoplasmique (rapport entre le volume du noyau et celui de la cellule) par mesure directe des volumes nucl\u00e9aires et cellulaires. J’ai pour cela utilis\u00e9 un algorithme de d\u00e9convolution d\u00e9velopp\u00e9 par mes soins appliqu\u00e9 \u00e0 des images de microscopie de fluorescence en chap large \u00e0 trois dimensions. Ces mesures ont \u00e9t\u00e9 faites sur des cellules uniques, permettant ainsi une analyse time-lapse du cycle cellulaire.<\/p>\n

Image (droite): Interface Graphique d\u00e9velopp\u00e9e pour l’analyse de Point Spread Function (PSF).<\/td>\n

\u00a0\"sliderGUI\"<\/a><\/td>\n<\/td>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

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